膠體金免疫層析測定試劑（盒）技術審評規(guī)范（征求意見稿）

膠體金免疫層析測定試劑（盒）技術審評規(guī)范

（征求意見稿）

本審評規(guī)范旨在指導注冊申請人對膠體金免疫層析測定試劑（盒）注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門對注冊申報資料的技術審評提供參考。

本審評規(guī)范是對膠體金免疫層析測定試劑（盒）的一般要求，申請人應依據具體產品的特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化，并依據產品特性確定其中的具體內容是否適用。

本審評規(guī)范是對申請人和審查人員的指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關人員應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本審評規(guī)范。

本審評規(guī)范是在現行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發(fā)展，本審評規(guī)范相關內容也將適時進行調整。

一、適用范圍

膠體金免疫層析測定試劑（盒）用于體外定量測定臨床樣本中待測物的含量。

從方法學考慮，本文主要指采用膠體金免疫層析原理，利用膠體金免疫層析閱讀儀，在醫(yī)學實驗室進行目標項目定量檢驗所使用的膠體金免疫層析定量測定試劑條/卡。本規(guī)范不適用于采用熒光標記或其他標記方法的免疫層析定量測定試劑（盒），但適用處可參照執(zhí)行。

依據《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《食品藥品監(jiān)管總局關于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管[2013]242號）,本規(guī)范適用于管理類別為Ⅱ類的膠體金免疫層析定量測定試劑條/卡，分類代號為6840。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產品預期用途、臨床意義、產品描述、有關生物安全性的說明、研究結果的總結評價以及同類產品上市情況介紹等內容，應符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》的相關要求和《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關要求。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

主要原材料（包括標記物、抗體及其他主要原料）的選擇、制備、質量標準及實驗驗證研究資料；質控品、校準品的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；校準品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數據及統(tǒng)計分析等詳細資料。

（三）主要生產工藝及反應體系的研究資料（如需提供）

1.主要生產工藝介紹，可以圖表方式表示；

2.反應原理介紹；

3.確定反應所需物質用量（校準品、樣本等）的研究資料；

4.確定反應最適條件研究；

5.其他：如基質效應等。

（四）分析性能評估資料

企業(yè)應提交在產品研制階段對試劑盒進行的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、試驗數據、統(tǒng)計方法等詳細資料。申請人應按以下要求提供體外診斷試劑性能評估資料：

1.申請人名稱；

2.性能評估方法、要求；

3.性能評估所使用試劑（包括校準品、質控品）的名稱、批號、有效期；

4.應提供使用的儀器型號、序列號（SN）；

5.性能評估的時間、地點、檢驗人員；

6.性能評估的具體數據及分析判定；

7.性能評估審批人簽字、審批時間。

對于本試劑盒，建議著重對以下分析性能進行研究：

1.準確度

對測量準確度的評價依次包括：與國家標準品（和/或國際標準品）的偏差分析、方法學比對等方法，企業(yè)可根據實際情況選擇合理方法進行研究。

（1）與國家（國際）標準品的比對研究

如該項目已有相應國家（國際）標準品，優(yōu)先使用國家（國際）標準品進行驗證，重點觀察對相應標準品檢測結果的偏差情況。

（2）方法學比對

如無相應國家（國際）標準品或在標準品無法獲得的前提下，可采用普遍認為質量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時檢測一批臨床樣品，從測定結果間的差異了解擬申報試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標本測定結果基本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學解釋，擬申報試劑與參比方法相比不會產生差異結果。

在實施方法學比對前，應分別對擬申報試劑和參比試劑進行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關的質量標準后方可進行比對試驗。方法學比對時應注意質量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結果進行合理的統(tǒng)計學分析。

（3）回收率

使用擬申報試劑（盒）在人源樣本中加入質量較好的純品物質或其溶液，計算回收率。

2.空白檢出限

空白檢出限為某特定分析方法在給定的置信度內可從樣品中檢出待測物質的最小濃度或最小量。

實際測試中常使用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本進行檢測，重復測定20次，得出20次測量結果的光電信號值，計算其平均值（M）和標準差（SD）,將M+2SD（如果試劑盒的原理為競爭法，為M-2SD）帶入濃度-光電信號值校準曲線中，求出對應的濃度值，即為空白檢出限。

3.重復性

測量重復性的評估可參考行業(yè)標準，選擇試劑盒的測量范圍內低、中、高不同濃度水平的樣本進行測量。建議采用與人源樣本基質接近的樣本進行試驗。

4.線性范圍

建立試劑線性范圍所用的樣本基質應盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度達到預期測定上限的混合人血清，制備低濃度樣本時應充分考慮稀釋對樣本基質的影響。建立線性范圍時，需在預期測定范圍內選擇至少7～11個濃度水平。例如，將預期測定范圍加寬至130%，在此范圍內選擇更多的濃度水平，然后依據實驗結果逐漸減少數據點（最終不得少于7個水平）直至表現出線性關系，可發(fā)現最寬的線性范圍。驗證線性范圍時可選擇5～7個濃度水平。

⒌批間差

用血清樣品或質控樣品分別測試3個不同批號的試劑（盒），每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值，計算相對極差（R）。

6.特異性

膠體金免疫層析測定是基于抗原抗體特異性結合反應進行的，對人樣本中可能的與待測物存在交叉反應的物質應進行測定。以HCG測定為例，應至少對樣本中如存在LH、FSH對測定結果產生的影響進行研究。方法通常為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應體現一定的統(tǒng)計學意義，說明樣本的制備方法及交叉實驗的評價標準，確定可接受的交叉物質的極限濃度。

交叉物質的極限濃度通常應考慮臨床樣本中可預見的濃度，可接受標準可以參考空白限或者檢測限濃度。

7. 干擾試驗

對樣本中常見的干擾物質進行檢測，如膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等。方法為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應體現一定的統(tǒng)計學意義，說明樣本的制備方法及干擾實驗的評價標準，確定可接受的干擾物質極限濃度。

8.校準品、質控品賦值

應參照GB/T 21415—2008《 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準品定值及不確定度計算記錄，提供質控品賦值及其靶值范圍確定的記錄。

9.其他需注意問題

應明確配套機型的性能評估資料。對于適用多個機型的產品，應提供如產品說明書【適用機型】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。

如有多個包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進行分析或驗證，如不同包裝規(guī)格產品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產品的分析性能評估。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產生的影響。試劑盒的樣本類型如包括血清和血漿樣本，則應對二者進行相關性研究以確認二者檢測結果是否完全一致或存在某種相關性（如系數關系）。對于血漿樣本，企業(yè)應對不同的抗凝劑進行研究以確認最適的抗凝條件以及是否會干擾檢測結果。

（五）參考區(qū)間確定資料

應提交建立參考區(qū)間所采用樣本來源及詳細的試驗資料。應明確參考人群的篩選標準，研究各組（如性別、年齡等）例數不應低于120例。

若引用針對中國人群參考值范圍研究的相關文獻，應明確說明出處，并進行驗證。參考值研究結果應在說明書【參考區(qū)間】項中進行相應說明。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究主要包括效期穩(wěn)定性、高溫加速破壞穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、機載穩(wěn)定性及開瓶（復溶）穩(wěn)定性等，企業(yè)可根據實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體方法及過程。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

應對樣本在不同儲存條件下的穩(wěn)定性期限進行研究，并在說明書中樣本要求處明示。（注：若有相關文獻中已明確說明，亦可作為依據。）

（七）臨床評價資料

體外診斷試劑臨床評價是指申請人或者備案人通過臨床文獻資料、臨床經驗數據、臨床試驗等信息對產品是否滿足使用要求或者預期用途進行確認的過程。

無需進行臨床試驗的體外診斷試劑，申請人應當通過對涵蓋預期用途及干擾因素的臨床樣本的評估、綜合文獻資料等非臨床試驗的方式對體外診斷試劑的臨床性能進行評價。申請人應當保證評價所用的臨床樣本具有可追溯性。

免于進行臨床試驗的體外診斷試劑目錄由國家食品藥品監(jiān)督管理總局制定、調整并公布。

臨床試驗（包括與已上市產品進行的比較研究試驗）是指在相應的臨床環(huán)境中，對體外診斷試劑的臨床性能進行的系統(tǒng)性研究。

膠體金免疫層析試紙應按照《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》執(zhí)行。

1.研究方法

選擇境內已批準上市的性能不低于擬申報產品的同類產品作為參比試劑，采用擬申報產品（以下稱考核試劑）與之進行對比試驗研究，證明本品與已上市產品等效。

⒉臨床研究單位的選擇

應選擇至少兩家省級衛(wèi)生醫(yī)療機構，臨床研究單位實驗操作人員應有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，考核試劑和參比試劑都應處于有效的質量控制下，最大限度保證試驗數據的準確性及可重復性。

3.倫理要求

臨床試驗必須符合赫爾辛基宣言的倫理學準則，必須獲得臨床試驗機構倫理委員會的同意。研究者應考慮臨床試驗用樣本，如血液、羊水、胸水、腹水、組織液、胸積液、組織切片、骨髓等的獲得或試驗結果對受試者的風險性，應提交倫理委員會的審查意見及受試者的知情同意書。對于例外情況，如客觀上不可能獲得受試者的知情同意或該臨床試驗對受試者幾乎沒有風險，可經倫理委員會審查和批準后免于受試者的知情同意。

4.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應從流行病學、統(tǒng)計學、臨床醫(yī)學、檢驗醫(yī)學等多方面考慮，設計科學合理的臨床研究方案。各臨床研究機構的方案設置應保持一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應在臨床研究機構的實驗室內并由本實驗室的技術人員操作完成，申報單位的技術人員除進行必要的技術指導外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數據收集過程。

試驗方案中應確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經入選的病例再被排除出臨床研究都應記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結果時應采用盲法以保證試驗結果的客觀性。各研究單位選用的參比試劑及所用機型應保持一致，以便進行合理的統(tǒng)計學分析。另外，考核試劑的樣本類型應與產品說明書一致，且不應超越參比試劑對樣本類型的檢測要求，如果選擇了參比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應采用臨床金標準對額外的樣本類型進行驗證。

5.研究對象選擇

臨床試驗應選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。企業(yè)在建立病例納入標準時，應考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進行結果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數據統(tǒng)計分析。

研究總體樣本數不少于200例，應充分考慮對病理值樣本的驗證，異常值樣本數建議不少于80例，其中高、低值各40例。樣本中待測物濃度應覆蓋考核試劑的測量范圍，且盡可能均勻分布。

血清/血漿應明確抗凝劑的要求、存貯條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本。實驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無法避免使用貯存樣品時，注明貯存條件及時間，在數據分析時應考慮其影響。

如果聲稱同時適用于血清/血漿/全血樣本，那么血清（或血漿或全血）的試驗例數參照上述要求，并應同時驗證其中至少100例受試者的自身血清、血漿和/或全血樣本測試結果間的一致性（采用考核試劑評價），其中不同濃度樣本分布情況與總例數中分布情況應一致。

如產品發(fā)生涉及檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項，臨床樣本總數至少為100例，并在至少兩家臨床試驗機構開展臨床試驗；變更主要原材料的供應商、參考區(qū)間的變化及增加臨床適應癥等變更事項，應根據產品具體變更情況，酌情增加臨床試驗總樣本數。

6.統(tǒng)計學分析

對臨床試驗結果的統(tǒng)計應選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關分析、線性回歸、絕對偏倚及相對偏倚分析等。對于對比實驗的等效性研究，最常用是對考核試劑和參比試劑兩組檢測結果的相關及線性回歸分析，應重點觀察相關系數（r值）或判定系數（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標。結合臨床試驗數據的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學負責人選擇合理的統(tǒng)計學方法進行分析，統(tǒng)計分析應可以證明兩種方法的檢測結果無明顯統(tǒng)計學差異。在臨床研究方案中應明確統(tǒng)計檢驗假設，即評價考核試劑與參比試劑是否等效的標準。

7.臨床試驗總結報告撰寫

根據《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》的要求，臨床試驗報告應該對試驗的整體設計及各個關鍵點給予清晰、完整的闡述，應該對整個臨床試驗實施過程、結果分析、結論等進行條理分明的描述，并應包括必要的基礎數據和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結報告中對以下內容進行詳述。

（1）臨床試驗總體設計及方案描述

①臨床試驗的整體管理情況、臨床研究單位選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹；

②病例納入/排除標準、不同人群的預期選擇例數及標準；

③樣本類型，樣本的收集、處理及保存等；

④統(tǒng)計學方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結果的標準。

（2）具體的臨床試驗情況

①考核試劑和參比試劑的名稱、批號、有效期及所用機型等信息；

②對各研究單位的病例數、人群分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數及百分比；

③質量控制，試驗人員培訓、儀器日常維護、儀器校準、質控品運行情況，對檢測精密度、質控品回收（或測量值）、抽查結果評估；

④具體試驗過程，樣本檢測、數據收集、樣本長期保存等。

（3）統(tǒng)計學分析

①數據預處理、對異常值或離群值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改；

②定量值相關性和一致性分析。

用回歸分析驗證兩種試劑結果的相關性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是考核試劑結果，x是參比試劑結果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數（通常要求R2≥0.95），同時應給出b的95%（或99%）置信區(qū)間。（對于理想的可信區(qū)間，回歸系數應涵蓋“1”, 截距應涵蓋“0”）。

給出考核試劑與參比試劑之間的差值（絕對偏倚/偏差）及比值（相對偏倚/偏差）散點圖，觀察并分析各點的偏倚分布情況。計算醫(yī)學決定水平處相對偏倚/偏差及95%置信區(qū)間。將醫(yī)學決定水平預期偏倚的可信區(qū)間與允許誤差的限值相比較（建議參照1/2CLIA’88、1/2室間質評可接受范圍、1/2來源于生物變異的總允許誤差、衛(wèi)生行業(yè)標準等相關要求設定允許誤差），如小于相關標準，判定兩檢測系統(tǒng)等效，如大于該標準，兩檢測系統(tǒng)不等效，需進一步臨床驗證。

（4）討論和結論

對總體結果進行總結性描述并簡要分析試驗結果，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結論。

（八）產品風險分析資料

申請人應考慮產品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關的特征、已知及可預見的危害等方面的判定以及對患者風險的估計進行風險分析，應符合YY/T 0316-2008 《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用》的要求。

（九）產品技術要求

擬定產品技術要求應符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局局令第5號）和《國家食品藥品監(jiān)督管理總局關于發(fā)布醫(yī)療器械產品技術要求編寫指導原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關規(guī)定。如已有相應的國家/行業(yè)標準發(fā)布，則技術要求不得低于其相關要求。

下面就產品技術要求中涉及的相關內容進行簡要敘述。

1. 產品型號/規(guī)格及其劃分說明

1.1應明確產品包裝規(guī)格；

1.2應明確試劑各組成成分。

2.性能指標

2.1 外觀

符合生產企業(yè)規(guī)定的正常外觀要求（一般應包括:檢測試紙應整潔完整、無毛刺、無破損、無污染，材料附著牢固；包裝標簽文字符號應清晰可辨）。

2.2寬度

應不低于企業(yè)聲稱的寬度。

2.3 移行速度

移行速度應不低于10 mm/min。

2.4 空白檢出限

空白檢出限應不高于企業(yè)宣稱。

2.5 線性范圍

線性相關系數（r）應不小于0.990。

2.6 準確度

2.6.1 相對偏差

相對偏差均不超過±15%。

2.6.2比對試驗

相關系數 r≥0.95。

2.6.3回收試驗

回收率應符合生產企業(yè)規(guī)定要求。

2.7 重復性

重復測試低、中、高濃度的樣本，所得結果的變異系數（CV%）應不大于20%。

2.8 批間差

用3個不同批號的試劑（盒）分別測試樣本，所得結果的批間相對極差（R）應不大于5%。

2.9 特異性

含特定濃度的可能與待測物存在交叉反應的結構類似物的人陰性樣本，測定結果應不高于企業(yè)宣稱的測定值。

2.10 穩(wěn)定性

2.10.1 效期穩(wěn)定性：試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，產品的性能應至少符合試劑空白檢出限、線性范圍、準確度和重復性的要求。

2.10.2 復溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用）：干粉試劑開瓶后（復溶后）在規(guī)定的貯存條件下保存至預期時間內，產品的性能應至少符合線性范圍、準確度和重復性的要求。

2.11 校準品和質控品（如適用）

若試劑盒配套校準品和質控品，應滿足如下要求

2.11.1溯源及賦值說明：應參照GB/T 21415—2008《 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》的要求溯源，并提供校準品溯源性說明及質控品賦值說明。

2.11.2性能要求：外觀、裝量、含水量（凍干品適用）、質控品賦值有效性、干粉或凍干品應包含批內瓶間差、復溶穩(wěn)定性。

3. 檢驗方法

3.1 外觀

目測檢查，應符合2.1的要求。

3.2 寬度

隨機抽取一條試紙，使用游標卡尺測量其寬度，應符合2.2的要求。

3.3 移行速度

按說明書進行操作，從樣本液進入檢測窗口開始用秒表計時，直至液體走完檢測窗口時停止計時，所用的時間記為t，用游標卡尺測量檢測窗口區(qū)的長度，記為L，則L/t為移行速度，結果應符合3.3的要求。

圖1 免疫層析試劑卡結構示意圖

3.4 空白檢出限

用零濃度校準品或樣本稀釋液作為樣本進行檢測，重復測定20次，得出20次測量結果的光電信號值，計算其平均值（M）和標準差（SD）,將M+2SD（如果試劑盒的原理為競爭法，為M-2SD）帶入濃度-光電信號值校準曲線中，求出對應的濃度值，即為空白檢出限，應符合2.4的要求。

3.5 線性范圍

用超出線性范圍上限濃度（活性）的樣品和超出或等于線性范圍下限濃度（活性）的樣本，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。分別測試試劑（盒），每個稀釋濃度測試3次，分別求出測定結果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（1）計算線性回歸的相關系數（r）。

        …………………………（1）

試劑（盒）的線性范圍內分析性能應符合2.5的要求。 

3.6 準確度

3.6.1 相對偏差

試劑（盒）測試可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(CRM)或其它公認的參考物質3次，測試結果記為（Xi），按公式（2）分別計算相對偏差B，如果3次結果的相對偏差均不超過±15%，即判為合格。如果大于等于2次的結果不符合，即判為不合格。如果有1次結果不符合要求，則應重新連續(xù)測試20次，并分別按照公式（2）計算相對偏差，如果大于等于19次測試結果的相對偏差均不超過±15%，即判為合格。

B%＝(Xi－T)／T×100%………… …………………… …（2）

式中：

Xi——測量值；

T——參考物質標示值。

3.6.2 比對試驗

用不少于40個在檢測濃度范圍內不同濃度的臨床樣品，以生產企業(yè)指定的分析系統(tǒng)作為比對方法，每份樣品按待測試劑（盒）操作方法及比對方法分別檢測。用線性回歸方法計算兩組結果的相關系數（r），應符合2.6.2的要求。

3.6.3 回收試驗

在臨床樣本中加入一定體積標準溶液（標準溶液體積與血清體積比應不大于1:20或其體積比不會產生基質的變化，加入標準溶液后樣品總濃度必須在試劑（盒）測定線性范圍內）或純品，每個濃度重復測定3次，按公式（3）計算回收率，應符合2.6.3的要求。

 ………………………………（3）

式中：

R——回收率；

V——加入標準液體積；

V0——人血清樣品的體積；

C ——人血清樣品加入標準液后的測定濃度；

C0——人血清樣品的測定濃度；

Cs——標準液的濃度。

3.7 重復性

測試低中高濃度的樣本，各重復測試10次，分別計算測量值的平均值（ ）和標準差（s）。所得結果的變異系數（CV）應符合2.7的要求。

3.8 批間差

用3個不同批號的試劑（盒）分別測試樣本，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值(i=1,2,3)，按公式（4）計算相對極差（R），應符合2.8的要求。

9    ………………………………………（4）

式中：

——10次測量結果的算術平均值；

——中的最大值；

 ——中的最小值。

3.9 特異性

將特定濃度的可能與待測物存在交叉反應的結構類似物加入人陰性樣本中，測定結果應符合2.9的要求。

3.10 穩(wěn)定性

3.10.1 效期穩(wěn)定性

取到效期后一定時間內的樣品按照 3.4、3.5、3.6、3.7 方法進行檢測，應符合2.10.1的要求；

3.10.2復溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用）：干粉試劑開瓶后（復溶后）在規(guī)定的貯存條件下保存至預期時間內，按照3.5、3.6、3.7 方法進行檢測，應符合2.10.2的要求。

4.附錄

如注冊單元中包含校準品（校準卡、校準信息）或質控品，應在附錄中明確校準品（校準卡、校準信息）、質控品的賦值程序。

（十）產品注冊檢驗報告

根據《體外診斷試劑注冊管理辦法》要求，首次申請注冊的第二類產品應該在國家食品藥品監(jiān)督管理總局認可的、具有相應承檢范圍的醫(yī)療器械檢測機構進行樣品的注冊檢測。對于已經有國家/國際標準品的檢測項目，在注冊檢測時應采用相應的國家/國際標準品進行。注冊申報資料中應包括相應的注冊檢驗報告和產品技術要求預評價意見。

（十一）產品說明書

說明書承載了產品預期用途、試驗方法、檢測結果解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據。因此，產品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產品說明書的格式應符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求，下面對膠體金免疫層析定量測定試劑（盒）說明書的重點內容進行詳細說明，以指導注冊申報人員更合理地完成說明書編制。

產品說明書內容原則上應全部用中文進行表述；如含有國際通用或行業(yè)內普遍認可的英文縮寫，可用括號在中文后標明；對于確實無適當中文表述的詞語，可使用相應英文或其縮寫。

1.【產品名稱】

（1）試劑（盒）名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。例如：心肌肌鈣蛋白I測定試劑（盒）（膠體金免疫層析法）。

（2）英文名稱（如有）應當正確、完整、直譯，不宜只寫縮寫。

2.【包裝規(guī)格】

（1）應與產品技術要求中所列的包裝規(guī)格一致。

（2）注明可測試的樣本數，如××人份/盒。

3.【預期用途】

應至少包括以下幾部分內容：

（1）說明試劑盒用于體外定量測定臨床樣本中待測物的含量。

（2）與預期用途相關的臨床適應癥背景情況，如臨床適應癥的發(fā)生率、易感人群等，相關的臨床或實驗室診斷方法等。

（3）明確配套儀器。

4.【檢驗原理】

采用特異性的抗原抗體反應及免疫層析分析技術，借助毛細管虹吸收作用，使樣品與膠體金標記物在膜上移動，若樣本中含有抗原（或抗體），與膠體金標記的抗體(或抗原)結合，擴散至膜上檢測區(qū)，與固定在檢測區(qū)上未標記的抗體(或抗原)結合，形成金標抗原復合物并顯色（T線），T線條帶顏色的深淺代表樣本中待測物的含量。若樣本中不含有抗原（或抗體），則檢測區(qū)不顯色。不論樣本中是否含有待測物，質控區(qū)都會顯色（C線），C線代表樣本層析過程是否正常，也可作為樣本量是否足夠的內控標準。通過膠體金免疫層析閱讀儀掃描檢測區(qū)（或檢測區(qū)與質控區(qū)），獲得相應的光信號強度，光信號強度與物質濃度成正相關，通過標準曲線計算出樣本中待測物濃度。

5.【主要組成成份】

（1）說明試劑盒包含組分的名稱、數量、主要組成成分，適用時應明確其比例或濃度等信息，如果對于正確的操作很重要，應提供其生物學來源、活性及其他特性。

（2）試劑盒中不包含但對該項檢測必須的組分，企業(yè)應明確其相關信息。

（3）明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。如果可以互換，應明確說明并提交相關驗證材料。

（4）說明試劑盒校準信息的提供形式及其溯源性，溯源性至少應寫明溯源到的最高級別。

（5）試劑盒內如包含質控品，應明確其靶值范圍。

6.【儲存條件及有效期】

（1）對試劑盒的效期穩(wěn)定性等信息做詳細介紹。包括環(huán)境溫濕度、避光條件等。

（2）不同組分保存條件及有效期不同時，應分別說明，產品總有效期以其中效期最短的為準。

（3）增加開封穩(wěn)定性要求。

注：保存條件不應有模糊表述，如“室溫”，應明確貯存溫度，如10℃～30℃，有效期12個月。穩(wěn)定期限應以月或日或小時為單位。

7.【適用儀器】

明確配套使用儀器的廠家、型號。

注：原則上應與臨床試驗、性能評估所用儀器一致。

8.【樣本要求】

重點明確以下內容：

（1）樣本采集前對患者的要求：如采集時間、采集順序等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。

（2）樣本采集：說明采集方法及樣本類型，如有血漿樣本，應注明對抗凝劑的要求。當血清存在脂濁、嚴重黃疸、溶血時，對本方法有干擾，應盡可避免此類樣本。

（3）樣本處理及保存：樣本處理方法（如稀釋，應明確稀釋方法和稀釋比例）、保存條件及期限、運輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復室溫，凍融次數。對儲存樣本的添加劑要求等。

（4）適用時應明確當測定值超出線性上限時的稀釋方法，并給出稀釋最大倍數說明。

9.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

（1）試驗具體操作步驟。

（2）試驗條件，如溫度、時間、儀器設定等以及試驗過程中的注意事項。

（3）校準：明確校準方法和校準周期。

（4）質量控制（如有）：明確質控方法和質控周期，如質控不合格應提供相關的解決方案。

10.【參考區(qū)間】

（1）應注明常用樣本類型的正常參考值（范圍）。

（2）明確參考區(qū)間確定的方法，如設定該參考區(qū)間所選健康人群的特征、樣本例數、統(tǒng)計方法等。

（3）建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間。

11.【檢驗結果的解釋】

（1）說明可能對試驗結果產生影響的因素。

（2）說明在何種情況下需要進行確認試驗。

12.【檢驗方法局限性】

（1）說明檢測結果僅供臨床參考，不能單獨作為確診或排除病例的依據，對患者的臨床診治應結合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

（2）說明該檢驗方法由于哪些原因會使測量結果產生偏離，或測量結果還不能完全滿足臨床需要。如：干擾（膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯等）等。

13.【產品性能指標】

產品性能指標應符合產品技術要求。說明該產品主要性能指標，應至少包括：外觀、膜條寬度、移行速度、空白檢出限、準確度、線性、重復性、批間差等。

14.【注意事項】應至少包括以下內容： 

（1）注明必要的注意事項，如本試劑僅用于體外診斷等。

（2）對所有樣本和反應廢棄物都應視為傳染源對待，提示操作者采取必要的防護措施。

15.【標識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。

16.【參考文獻】

注明引用參考文獻，其書寫應清楚、易查詢且格式規(guī)范統(tǒng)一。

17.【基本信息】

（1）注冊人與生產企業(yè)為同一企業(yè)的，按以下格式標注基本信息：

注冊人/生產企業(yè)名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務單位名稱

聯(lián)系方式

生產地址

生產許可證編號

（2）委托生產的按照以下格式標注基本信息：

注冊人/生產企業(yè)名稱

住所

聯(lián)系方式

售后服務單位名稱

聯(lián)系方式

受托企業(yè)的名稱

住所

生產地址

生產許可證編號

18.【醫(yī)療器械注冊證書編號/產品技術要求編號】

注明該產品的注冊證書編號/產品技術要求編號。

19.【說明書核準日期及修訂日期】

注明該產品說明書的核準日期。如曾進行過說明書的變更申請，還應該同時注明說明書的修改日期。

（十二）標簽樣稿

1.外包裝標簽

（1）注冊人名稱、住所、聯(lián)系方式。

（2）生產企業(yè)名稱、生產地址、聯(lián)系方式、生產許可證編號。

（3）試劑（盒）名稱。

（4）批號。如試劑（盒）包含不同批號的組件，外包裝的批號應能保證每個組件的批號可從生產企業(yè)的生產記錄中溯源。

（5）規(guī)格型號。應包含體積或復溶后的體積。

（6）預期用途。如試劑（盒）名稱不能反映試劑（盒）的預期用途，應提供簡要的預期用途說明。

（7）體外診斷用途。

（8）儲存和處置條件。應提供在未開封狀態(tài)下可保證試劑（盒）的穩(wěn)定狀態(tài)的必要儲存條件；應規(guī)定影響穩(wěn)定性的其他條件（如適用）；應規(guī)定產品處置時所采取的所有其他特殊措施（如適用）。

（9）失效期。應明示在規(guī)定儲存條件下的失效期；失效期應以年、月，適當時以日表示；如僅給出年月，失效期應為指定月最后一天；外包裝標簽上明示的失效期應為最早到期組件的失效期。

（10）警告和預防措施。如體外診斷試劑（盒）被認為有危險性（例如：化學，放射性或生物危害性），外包裝應標有適當的警示危險的文字或符號，YY/T 0316的要求適用；對于化學危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當的危險和安全性說明的使用說明，則應在外包裝的標簽上進行說明。

（11）生產日期。

（12）醫(yī)療器械注冊證/產品技術要求編號。

醫(yī)療器械標簽因位置或者大小受限而無法全部標明上述內容的，至少應當標注產品名稱、型號、規(guī)格、生產日期和使用期限或者失效日期，并在標簽中明確“其他內容詳見說明書”。

2.初始包裝標簽

如初始包裝同時也是外包裝，則外包裝標簽的要求也適用。

（1）生產企業(yè)名稱或等同的商標或標志；

（2）產品名稱；

（3）批號；

（4）規(guī)格型號；

（5）體外診斷用途；

（6）儲存和處置條件（參見外包裝標簽要求）；

（7）失效期（參見外包裝標簽要求）；

（8）警告和預防措施（參見外包裝標簽要求）。

（十三）出廠檢驗原則

每批試劑（盒）出廠檢驗至少進行以下幾項內容：外觀、寬度、移行速度、空白檢出限、線性范圍、準確度、重復性、賦值有效性（如適用）。

三、審查關注點

（一）技術要求中性能指標的設定及檢驗方法是否符合相關行業(yè)標準的要求；技術要求的格式是否符合《醫(yī)療器械產品技術要求編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關規(guī)定；

（二）產品說明書的編寫內容及格式是否符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，相關內容是否符合《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）中對說明書的要求。

（三）分析性能評估指標及結果是否滿足產品技術要求的規(guī)定；是否滿足本規(guī)范中各指標驗證的要求。

（四）參考區(qū)間確定使用的方法是否合理，數據統(tǒng)計是否符合統(tǒng)計學的相關要求，結論是否和說明書聲稱一致。

（五）試劑盒的穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結論是否和說明書聲稱一致。

（六）臨床試驗采用的樣本類型及病例是否滿足試劑盒聲稱的預期用途，樣本量及臨床研究單位的選擇、對比試劑的選擇、統(tǒng)計方法及研究結果、臨床方案及報告撰寫的格式等是否符合《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）對相關內容的規(guī)定。

（七）產品風險分析資料的撰寫是否符合YY/T 0316-2008《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用》的要求。

四、參考文獻

（一）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（二）《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告第16號）

（三）《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告第17號）

（四）《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）

（五）全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）（中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司）

（六）GB/T21415 《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》

（七）YY/T1164 人絨毛膜促性腺激素（HCG）檢測試紙（膠體金免疫層析法）

《膠體金免疫層析測定試劑（盒）技術審評規(guī)范》編寫說明

一、編寫目的和背景

2014年《體外診斷試劑注冊管理辦法》、《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》均已發(fā)布，編制本指導原則旨在指導和規(guī)范膠體金免疫層析測定試劑（盒）產品的技術審評工作，幫助審評人員理解和掌握該類產品原理、組成、性能、預期用途等內容，把握技術審評工作基本要求和尺度，對產品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價。

由于膠體金免疫層析測定試劑（盒）產品仍在不斷發(fā)展，審查員仍需從風險分析的角度認真確認申報產品的預期用途與風險管理是否相當；由于我國醫(yī)療器械法規(guī)框架仍在構建中，審查員仍需密切關注相關法規(guī)、標準及最新進展，關注審評產品實際組成、原理、預期用途等方面的個性特征，以保證產品審評符合現行法規(guī)安全、有效的要求。

二、編寫依據

（一）《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（中華人民共和國國務院令第650號）

（二）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（三）《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）

（四）《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（五）GB/T 26124-2011《臨床化學體外診斷試劑(盒)》

（六）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

三、規(guī)范中部分內容的說明

（一）本審評規(guī)范適用于采用膠體金免疫層析原理，利用膠體金免疫層析閱讀儀，在醫(yī)學實驗室進行定量檢驗所使用的臨床化學體外診斷試劑。采用其他方法學原理測定的體外診斷試劑可借鑒參考本文中相關內容。

（二）產品的具體性能指標主要參考了YY/T1164-2009 人絨毛膜促性腺激素（HCG）檢測試紙（膠體金免疫層析法）和YY/T 1192-2011人絨毛膜促性腺激素（HCG）定量測定試劑（盒）（化學發(fā)光免疫分析法）行業(yè)標準，定性檢測體外診斷試劑(盒)產品技術審評規(guī)范和臨床化學體外診斷試劑(盒)產品技術審評規(guī)范（2011版）。

（三）對于準確度要求，考慮到行業(yè)內普遍反映出廠檢驗批次多，標準物質用量大、費用高，企業(yè)難以承受。故建議型式檢驗時，使用標準物質評價，出廠檢驗時，生產企業(yè)可以選擇型式檢驗方式，也可以使用具有溯源性的企業(yè)（工作）校準品或正確度質控物質進行評價。

（四）臨床試驗在遵循《體外診斷試劑臨床研究技術指導原則》（國食藥監(jiān)械〔2007〕240號）的前提下，參考NSLI EP9-A2《用患者樣本進行方法比對及偏倚評估》細化補充了試驗管理和統(tǒng)計分析方面的內容。

（五）文中涉及的術語和定義參考ISO18113系列標準確定。

（六）產品的臨床意義、主要性能及臨床試驗要求征求了相關醫(yī)療單位臨床專家的意見，并征求了部分?。▍^(qū)、市）食品藥品監(jiān)督管理局、審評機構以及生產企業(yè)的意見。

四、規(guī)范編寫人員

本規(guī)范的編寫成員由北京市醫(yī)療器械技術審評中心審評人員、北京市食品藥品監(jiān)督管理局行政審批人員、國家食品藥品監(jiān)督管理局北京市醫(yī)療器械質量監(jiān)督檢驗中心專家、臨床醫(yī)學專家、工程學專家、專業(yè)廠家代表共同組成，全程參與了本規(guī)范的研討和制訂，以充分利用各方面的信息和資源，綜合考慮規(guī)范中各個方面的內容，盡量保證規(guī)范正確、全面、實用。隨著膠體金免疫層析測定試劑（盒）產品的發(fā)展，以及國內外相關標準的更新，包括人們認知水平及的提高，如果在規(guī)范執(zhí)行過程中有任何問題，請及時向我局反饋。

來源：北京市食品藥品監(jiān)督管理局